Đức Anastasiô sinh tại Rôma trong dòng họ Massimi. Một ngày sau khi Đức Giáo hoàng Siriciô qua đời, ngài được bầu chọn làm Giáo hoàng. Ngài lên án Ôrigênê và những người theo phái Đônatô nhưng đồng thời ngài cũng là nhà hòa giải, đặc biệt trong cuộc tranh cãi với Ôrigênê. Ngài đã đưa ra quy định các linh mục phải cúi đầu, trùm khăn khi nghe đọc Phúc âm và những người dị dạng, có khuyết tật không thể trở thành Giáo sĩ.

Ngài qua đời ngày 19-12-401, được an táng tại nghĩa trang Ursum Pileatum trên đường Portuense, sau đó được cải táng về nhà thờ thánh Martinô des Monts tại Rôma